摘要:目的:观察异丹叶大黄素(ISO)对低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的影响,并探讨其可能机制。方法:不同浓度的ISO在低氧或常氧培养条件下孵育大鼠PASMCs 24 h后,CCK-8试剂盒检测细胞增殖与细胞毒作用,流式细胞仪分析细胞周期,实时定量PCR(RT-PCR)检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、细胞周期蛋白E(Cyclin E)、细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)、细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)、细胞周期蛋白依赖性激酶6(CDK6) mRNA的表达,Western Blot检测总的及磷酸化的磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)与蛋白激酶B(Akt)表达,荧光酶标仪检测活性氧族(ROS)的产生。结果:CCK-8检测结果表明ISO能够抑制低氧PASMCs增殖(P<0.05),且实验浓度ISO对PASMCs无明显毒性作用(P>0.05);流式细胞仪结果表明ISO使处于G0/G1期的PASMCs比例增加(P<0.05),处于S期PASMCs比例减少(P<0.05); RT-PCR检测结果表明ISO能够抑制Cyclin D1、CyclinE、CDK2、4、6 mRNA的表达(P<0.05); Western Blot检测结果表明ISO能够抑制PI3K/Akt信号通路的活化(P <0.05);荧光酶标仪检测结果表明ISO能够抑制ROS的产生(P <0.05)。结论:ISO可抑制低氧PASMCs增殖,其机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路的活化及ROS的产生有关。 |