| 摘要：目的:探讨异橙黄酮对胃癌细胞AGS增殖、凋亡和周期的影响及相关作用机制。方法:用2.5,5和10μmol·L-1的异橙黄酮处理胃癌AGS细胞,另设阴性对照组,加入等体积的DMSO。应用CCK-8、EDU和流式细胞数检测各组AGS细胞增殖、凋亡和周期情况;分子对接技术明确异橙黄酮的可能作用靶点;Western blot检测各组AGS细胞中蛋白激酶B（AKT）、磷酸化蛋白激酶B （p-AKT）、糖原合酶激酶3β（GSK-3β）、磷酸化糖原合酶激酶3β（9号丝氨酸位点）[p-GSK-3β（ser9）]、β-连环蛋白（β-catenin）、B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白（Bcl-2）、Bcl-2相关X调控因子（Bax）、半胱天冬酶-8剪切体（cleave-caspase-8）、周期素依赖性激酶4 （CDK4）和周期素依赖性激酶6 （CDK6）的表达。以10μmol·L-1的异橙黄酮、10μmol·L-1的异橙黄酮联合10μmol·L-1AKT激动剂SC79以及等体积的DMSO（对照）处理胃癌AGS细胞,应用Western blot检测AKT、p-AKT、GSK-3β、p-GSK-3β（ser9）和β-catenin的表达,以及应用CCK-8、EDU和流式细胞数检测各组AGS细胞增殖、凋亡和周期情况。结果:与阴性对照组相比,2.5,5和10μmol·L-1异橙黄酮处理组AGS细胞增殖均明显减弱,凋亡率均明显增加,显著阻滞在G1期（P<0.05或P<0.01）,异橙黄酮能与AKT的活性口袋稳定结合,显著减少胃癌AGS细胞中p-AKT、p-GSK-3β（ser9）、β-catenin、Bcl-2、CDK4和CDK6的表达以及增加Bax和cleave-caspase-8的表达（P<0.05或P<0.01）。与10μmol·L-1的异橙黄酮处理组相比,10μmol·L-1的异橙黄酮联合10μmol·L-1的AKT激动剂SC79处理组细胞p-AKT、p-GSK-3β（ser9）和β-catenin的表达显著增加,细胞增殖率明显增加,凋亡率明显减少,且G1期细胞阻滞程度明显减弱（P<0.05或P<0.01）。结论:异橙黄酮可能通过AKT/GSK-3β/β-catenin信号通路抑制AGS细胞的增殖以及诱导其凋亡和周期阻滞。 |
