摘要:目的:探讨黄芩总黄酮对人骨关节炎(OA)软骨细胞增殖凋亡及X型胶原蛋白α1链(COL10A1)/性别决定区Y框蛋白9(SOX9)信号通路的影响。方法:从5例行膝关节置换术的OA患者的关节软骨分离软骨细胞,用甲苯胺蓝染色进行鉴定。实验分为对照组、黄芩总黄酮低、中、高剂量组(25,50,100 mg·L-1)和塞来昔布组(9 mg·L-1)。噻唑蓝(MTT)法测定人OA软骨细胞增殖情况,流式细胞仪测定细胞凋亡水平,免疫印迹法检测人OA软骨细胞中COL10A1、SOX9、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白水平。结果:人OA软骨细胞附着于培养皿后呈多边形或长条形,甲苯胺蓝染色可见OA软骨细胞胞浆以蓝紫色为主,异染颗粒散布于细胞间或细胞周围;与对照组比较,黄芩总黄酮低、中、高剂量组和塞来昔布组人OA软骨细胞增殖率、COL10A1、SOX9、Bcl-2蛋白和Bcl-2/Bax水平升高,凋亡率、ERK1/2和Bax蛋白水平降低(P<0.05);随着黄芩总黄酮浓度的增加,黄芩总黄酮各剂量组人OA软骨细胞增殖率、COL10A1、SOX9、Bcl-2蛋白和Bcl-2/Bax水平逐渐升高,凋亡率、ERK1/2和Bax蛋白水平逐渐降低(P<0.05);黄芩总黄酮高剂量组与塞来昔布组作用相似,上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:黄芩总黄酮可能通过激活COL10A1/SOX9信号通路,抑制人OA软骨细胞凋亡,促进OA软骨细胞增殖。 |