| 摘要：目的:探讨知母皂苷AⅢ(TAⅢ)对非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞增殖、迁移和侵袭的影响机制。方法:用不同浓度的TAⅢ处理A549细胞后，CCK-8法检测TAⅢ对A549细胞的细胞毒性。体外培养A549细胞，分为对照组(Control组)、TAⅢ组(20μmol·L-1)、TAⅢ+anti-NC组、TAⅢ+anti-miR-129-5p组，实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测细胞中miR-129-5p、信号转导和转录激活因子3(STAT3)mRNA表达，蛋白质印迹(Western blot)检测STAT3及其磷酸化蛋白(p-STAT3)表达，平板克隆实验检测细胞增殖活力，Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力。双荧光素酶实验验证miR-129-5p和STAT3的靶向关系。BALB/c裸鼠移植瘤实验检测TAIII在体内的抗肿瘤活性，免疫组织化学(IHC)法检测肿瘤组织Ki-67、p-STAT3表达。结果:低浓度TAⅢ(1,5μmol·L-1)对A549细胞存活率无显著影响(P>0.05),高浓度TAⅢ(10,20,30,60μmol·L-1)呈浓度依赖性降低A549细胞存活率(P<0.05)。TAⅢ可显著升高A549细胞中miR-129-5p水平，降低STAT3 mRNA和蛋白以及p-STAT3蛋白水平，抑制A549细胞的克隆形成和迁移、侵袭能力(P<0.05);双荧光素酶实验证实STAT3是miR-129-5p的潜在靶标(P<0.05);体内实验证实，TAⅢ可抑制裸鼠体内移植瘤生长(P<0.05);下调miR-129-5p可增强STAT3表达和活化，减弱TAⅢ对NSCLC细胞恶性表型和体内移植瘤生长的抑制作用(P<0.05)。结论:TAⅢ可能通过上调miR-129-5p,抑制STAT3表达和活化，进而抑制A549细胞增殖、迁移和侵袭。 |
