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| 山奈酚通过调控miR-21/SOX9对骨关节炎软骨细胞增殖、凋亡的影响 |
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| DOI： |
| 中文关键词: 山奈酚 骨关节炎 miR-21 性别决定区Y框蛋白9 细胞增殖 细胞凋亡 |
| 英文关键词: |
| 基金项目:深圳市卫生计生系统科研项目(编号：SZFZ2018037)； |
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| 中文摘要: |
| 摘要：目的:探讨山奈酚(KAE)对骨关节炎软骨细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法:将C28/I2细胞分为对照组(正常培养的C28/I2细胞)、模型组(100 ng·ml-1?LPS)、山奈酚低(KAE-L组，25μmol·L-1?KAE+100 ng·ml-1?LPS)、中(KAE-M组，50μmol·L-1?KAE+100 ng·ml-1?LPS)、高(KAE-H组，100μmol·L-1?KAE+100 ng·ml-1?LPS)剂量组。利用LipofectamineTM2000转染试剂盒对C28/I2细胞进行转染，并分为：mimics NC组(转染mimics NC+100 ng·ml-1?LPS)、miR-21 mimics组(转染miR-21 mimics+100 ng·ml-1?LPS)、inhibitor NC组(转染inhibitor NC+100 ng·ml-1?LPS)、miR-21 inhibitor组(转染miR-21 inhibitor+100 ng·ml-1?LPS)、pcDNA组(转染pcDNA+100 ng·ml-1?LPS)、pcDNA-SOX9组(转染pcDNA-SOX9+100 ng·ml-1?LPS)。另取部分mimics NC组、miR-21 mimics组C28/I2细胞，用100μmol·L-1?KAE处理，记作KAE+mimics NC组、KAE+miR-21 mimics组。采用MTT法检测细胞活力；流式细胞术检测细胞凋亡；qRT-PCR检测细胞中miR-21表达；Western Blot检测细胞中性别决定区Y框蛋白9(SOX9)蛋白表达；双荧光素酶报告基因实验验证miR-21与SOX9靶向关系。结果:与对照组比较，模型组C28/I2细胞中SOX9蛋白表达、细胞活力显著降低，miR-21表达、细胞凋亡率显著升高(P<0.05);与模型组比较，KAE各剂量组C28/I2细胞中SOX9蛋白表达、细胞活力显著升高，miR-21表达、细胞凋亡率显著降低(P<0.05);miR-21可靶向负调控SOX9表达；抑制miR-21或上调SOX9均可促进LPS诱导的C28/I2细胞增殖，抑制细胞凋亡；miR-21过表达逆转了KAE(100μmol·L-1)对LPS诱导的C28/I2细胞增殖、凋亡的作用。结论:KAE可能通过下调miR-21表达，上调SOX9表达促进LPS诱导的C28/I2细胞增殖，抑制细胞凋亡。 |
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