摘要:目的:研究扁蒴藤素下调整合素β1(integrinβ1)对肺癌A549细胞侵袭、迁移的影响。方法:体外培养肺癌A549细胞,完全培养液稀释后扁蒴藤素终浓度分别为0,5,10,20,40,80μg·ml-1继续培养48 h,检测450 nm下各孔细胞光密度(OD)值,并计算半抑制浓度(IC50)。实验分为空白对照组、扁蒴藤素组、integrinβ1抑制剂(HMIβ1-1)组、扁蒴藤素+integrinβ1抑制剂组。空白对照组仅添加培养液,扁蒴藤素组添加终浓度为25.39μg·ml-1扁蒴藤素的培养液,integrinβ1抑制剂组添加终浓度为10μg·ml-1HMIβ1-1的培养液,扁蒴藤素+integrinβ1抑制剂组在扁蒴藤素组基础上添加10μg·ml-1?HMIβ1-1。Transwell检测细胞侵袭和迁移情况;划痕实验检测细胞迁移情况;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中integrinβ1 mRNA表达情况;蛋白免疫印迹检测细胞中integrinβ1、纤维粘连蛋白(FN)、基质金属蛋白酶2(MMP2)蛋白表达情况。结果:与0和5μg·ml-1扁蒴藤素相比,10,20,40,80μg·ml-1扁蒴藤素OD值依次降低(P<0.05),IC50为25.39μg·ml-1。与空白对照组相比,扁蒴藤素组、integrinβ1抑制剂组侵袭、迁移细胞数量、划痕愈合率、细胞中integrinβ1 mRNA和蛋白水平、FN、MMP2蛋白水平显著降低(P<0.05);与扁蒴藤素组、integrinβ1抑制剂组相比,扁蒴藤素+integrinβ1抑制剂组侵袭、迁移细胞数量,划痕愈合率、细胞中integrinβ1 mRNA和蛋白水平、FN蛋白水平显著降低(P<0.05)。结论:扁蒴藤素可下调integrinβ1从而抑制肺癌A549细胞侵袭、迁移。 |